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分子雜交儀的原理

更新時(shí)間:2018-01-26   點(diǎn)擊次數(shù):2119次

分子雜交儀(又名:分子雜交箱、分子雜交爐)廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中定基因序列的定性、定量檢測(cè)和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學(xué)域中具有廣泛地應(yīng)用,而且在臨床診斷上的應(yīng)用也日趨增多。

原理

分子雜交儀其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì),使來源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補(bǔ)關(guān)系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。

核酸分子雜交是基因診斷的zui基本的方法之。它的基本原理是:互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在定條件下結(jié)合成雙鏈,即能夠行雜交。這種結(jié)合是異的,即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則行,它不僅能在DNA和DNA之間行,也能在DNA和RNA之間行。因此,當(dāng)用段已知基因的核酸序列作出探針,與變性后的單鏈基因組DNA接觸時(shí),如果兩者的堿基配對(duì),它們即互補(bǔ)地結(jié)合成雙鏈,從而表明被測(cè)基因組DNA中含有已知的基因序列。由此可見,行基因檢測(cè)有兩個(gè)條件,是需的異的DNA探針;二是需的基因組DNA。當(dāng)兩者都變性呈單鏈狀態(tài)時(shí),就能行分子雜交。

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